 |
L'ADN,
ou acide désoxyribonucléique, est une molécule
d'acide nucléique
présente dans toutes les cellules vivantes. On parle d'ADN nucléaire
pour désigner celui que l'on trouve dans les cellules eucaryotes,
et d'ADN bactérien pour désigner celui que l'on rencontre dans les Bactéries
(organismes procaryotes). On connaît aussi d'autres formes d'ADN comme
ceux que renferment les mitochondries et
les chloroplastes. Il contient toutes les
informations nécessaires pour construire et faire fonctionner un organisme
vivant, qu'il s'agisse d'une bactérie, d'une plante, d'un animal ou d'un
ĂŞtre humain.
L'ADN nucléaire
est le principal support de l'information génétique chez les eucaryotes
et réside au coeur du noyau
cellulaire. Il contient la vaste majorité
des gènes et est responsable de l'hérédité
classique. L'ADN nucléaire est organisé en structures linéaires
appelées chromosomes. Chez l'humain, par
exemple, l'ADN nucléaire est organisé en 23 paires de chromosomes, soit
46 chromosomes au total dans chaque cellule somatique.
L'ADN a une forme
caractéristique de double hélice, un peu comme une échelle torsadée.
Cette échelle est faite de deux brins enroulés l'un autour de l'autre.
Chaque brin de l'ADN est composé de petites unités appelées nucléotides.
Il existe quatre types de nucléotides, chacun identifié par une base
azotée (ou nucléobase) : adénine (A),
thymine (T),, cytosine (C), guanine (G). L'ordre dans lequel ces bases
azotées se succèdent le long de la molécule d'ADN, en formant des séquences
appelées gènes, constitue le code génétique. C'est ce code qui détermine
les caractéristiques d'un organisme, comme la couleur des yeux, la taille,
ou encore certaines prédispositions à des maladies. L'ADN humain renferme
autour de 3,4 milliards de nucléobases (certaines plantes peuvent en avoir
plus de 100 milliards).
Base historique
de la compréhension moderne.
L'ADN a d'abord
été isolé vers 1870 par Friedrich Miescher, qui l'a appelé nucléine
parce qu'il était issu de noyaux des globules blancs ( Le
sang). Les expériences, en 1928, de Frederick Griffith avec des souches
de Streptococcus pneumoniae ont fourni le premier indice que l'ADN pourrait
ĂŞtre un principe transformant.
Avery, MacLeod et
McCarty (1944) ont ensuite prouvé que l'ADN est effectivement requis pour
la transformation des bactéries.
Des expériences
ultérieures par Hershey et Chase (1952) utilisant le bactériophage
T2 ont prouvé que l'ADN constitue le matériel génétique.
Erwin Chargaff a
constaté que le rapport de A = T et C = G, et que la teneur en pourcentage
de A, T, G et C est différent pour différentes espèces.
Le modèle actuellement
accepté de la structure à double hélice de l'ADN a été publié en
1953 par James Watson, Francis
Crick et Rosalind Franklin, sur
la base des travaux de Maurice Wilkins et Rosalind Franklin.
-
Double
hélice de l'ADN. - L'ADN se présente sous la forme d' une double
hélice antiparallèle. L'épine dorsale phosphatée (indiquée par les
lignes courbes) se situe à l'extérieur et les bases azotées à l'intérieur.
Chaque base d'un brin interagit via une liaison hydrogène avec une base
du brin opposé.
Crédit : Jerome Walker et Dennis
Myts. |
Structure en double
hélice de l'ADN.
Le diamètre de
la double hélice, 2 nm, est uniforme partout. Le sucre et le phosphate
se trouvent à l'extérieur de l'hélice, formant l'épine dorsale de l'ADN.
Les bases azotées sont empilées à l'intérieur, comme les marches d'un
escalier, par paires; les paires sont liées les unes aux autres par des
liaisons hydrogène. Chaque paire de bases de la double hélice est séparée
de 0,34 nm de la paire de bases suivante. Un tour de l'hélice compte
dix paires de bases.
Les deux brins de
l'hélice courent dans des directions opposées, ce qui signifie que l'extrémité
carbone 5' d'un brin fera face à l'extrémité carbone 3' de son brin
correspondant. Ceci est appelé orientation antiparallèle. Cette
orientation est importante pour la réplication
de l'ADN et dans de nombreuses interactions avec les acides nucléiques.
Seuls certains types
d'appariement de base sont autorisés. Par exemple, une certaine purine
ne peut être associée qu'à une certaine pyrimidine. Cela signifie que
A peut être associé à T et que G peut être associé à C. En d'autres
termes, les brins d'ADN sont complémentaires les uns des autres. Si la
séquence d'un brin est AATTGGCC, le brin complémentaire aurait la séquence
TTAACCGG.
-
Complémentarité
des bases azotées. - Dans une molécule d'ADN, les deux brins sont
antiparallèles l'un Ă l'autre de sorte qu'un brin s'Ă©tend de 5' 'Ă
3' et l'autre de 3 'Ă 5'. L'Ă©pine dorsale phosphatĂ©e est situĂ©e Ă
l'extérieur et les bases sont au milieu. L'adénine forme des liaisons
hydrogène (ou paires de bases) avec la thymine et les paires de bases
guanine avec la cytosine. |
La réplication
de l'ADN
Pendant la division
cellulaire, chaque cellule fille reçoit une copie de l'ADN par un
processus appelé réplication ou duplication de l'ADN. Comme
l'a montré une expérience de Matthew Meselson et Franklin Stahl en 1958,
lors de la réplication de l'ADN chacun des deux brins d'ADN parentaux
sert de modèle pour le nouvel ADN à synthétiser; après réplication,
chaque ADN Ă double brin comprend un brin parental ou "ancien" et un "nouveau"
brin. C'est ce que l'on a appelé la réplication semi-conservatrice.
Diverses enzymes
interviennent dans la facilitation de cette réplication (hélicase, primase,
ADN-polymérase, et ADN-ligase, cette dernière intervenant spécialement
dans la réparation des erreurs de réplication et dans la recombinaison
génétique).
Réplication
de l'ADN chez les procaryotes.
La plupart des procaryotes
contiennent un seul chromosome circulaire. La réplication chez les procaryotes
commence à partir d'une séquence trouvée sur ce chromosome appelée
l'origine de la réplication - le point auquel l'ADN s'ouvre. Une enzyme,
l'hélicase, ouvre la double hélice d'ADN, entraînant la formation de
la fourche de réplication. Les protéines de liaison simple brin se lient
à l'ADN simple brin près de la fourche de réplication pour garder la
fourche ouverte. Une autre enzyme,
la primase, synthétise une amorce d'ARN pour initier
la synthèse par l'ADN-polymérase, qui ne peut ajouter des nucléotides
que dans la direction 5 'à 3'. Un brin est synthétisé en continu dans
le sens de la fourche de réplication; c'est ce qu'on appelle le premier
volet. L'autre brin est synthétisé dans une direction éloignée de la
fourche de réplication, en de courts segments d'ADN appelés
fragments
d'Okazaki. Ce brin est connu sous le nom de brin retardé. Une
fois la réplication terminée, les amorces d'ARN sont remplacées par
des nucléotides d'ADN et l'ADN est scellé avec de l'ADN-ligase, ce qui
crée des liaisons phosphodiester entre le 3'-OH d'une extrémité et le
phosphate 5 'de l'autre brin.
-
Une
fourche de réplication est formée lorsque l'hélicase sépare les
brins d'ADN à l'origine de la réplication. L'ADN a tendance s' enrouler
davantage devant la fourche de réplication. La topoisomérase se casse
et réforme l'épine dorsale du phosphate de l'ADN en avant de la fourche
de réplication, soulageant ainsi la pression qui résulte de ce super-enroulement.
Les protéines de liaison simple brin se lient à l'ADN simple brin pour
empêcher l'hélice de se reformer. La primase synthétise une amorce d'ARN.
L'ADN polymérase III utilise cette amorce pour synthétiser le brin d'ADN
fils. Sur le brin principal, l'ADN est synthétisé en continu, tandis
que sur le brin retardé, l'ADN est synthétisé en courtes séquences
appelées fragments d'Okazaki. L'ADN-polymérase I remplace l'amorce d'ARN
par de l'ADN. L'ADN ligase scelle les espaces entre les fragments d'Okazaki,
reliant les fragments en une seule molécule d'ADN. (crédit : Mariana
Ruiz Villareal). |
Réplication
de l'ADN chez les eucaryotes.
La réplication
chez les eucaryotes commence à plusieurs origines. Le mécanisme est assez
similaire à celui observé chez les procaryotes. Une amorce est nécessaire
pour initier la synthèse, qui est ensuite étendue par l'ADN-polymérase
lorsqu'elle ajoute des nucléotides un par un à la chaîne en croissance.
Le brin principal est synthétisé en continu, tandis que le brin retardé
est synthétisé en courtes séquences, les fragments d'Okazaki. Les amorces
d'ARN sont remplacées par des nucléotides d'ADN; l'ADN reste un brin
continu en liant les fragments d'ADN avec l'ADN-ligase. Les extrémités
des chromosomes posent un problème car la polymérase est incapable de
les étendre sans amorce. La télomérase, une enzyme avec une matrice
d'ARN intégrée, prolonge les extrémités en copiant la matrice d'ARN
et en étendant une extrémité du chromosome. L'ADN-polymérase peut ensuite
étendre l'ADN à l'aide de l'amorce. De cette façon, les extrémités
des chromosomes sont protégées.
La
réparation de l'ADN.
L'ADN-polymérase
peut faire des erreurs lors de l'ajout de nucléotides. Il modifie l'ADN
en relisant chaque base nouvellement ajoutée. Les bases incorrectes sont
supprimées et remplacées par la base correcte, puis une nouvelle base
est ajoutée. La plupart des erreurs sont corrigées au cours de la réplication,
bien que lorsque cela ne se produit pas, le mécanisme de réparation des
disparités sot utilisé. Les enzymes de réparation des mésappariements
reconnaissent la base mal incorporée et l'extraient de l'ADN, en la remplaçant
par la base correcte. Dans encore un autre type de réparation, la réparation
par excision nucléotidique, la base incorrecte est supprimée avec quelques
bases à l'extrémité 5 'et 3', et celles-ci sont remplacées en copiant
la matrice à l'aide de l'ADN-polymérase. Les extrémités du fragment
nouvellement synthétisé sont attachés au reste de l'ADN à l'aide de
l'ADN-ligase, ce qui crée une liaison phosphodiester.
La plupart des erreurs
sont ainsi corrigées, mais celles qui ne le sont pas peuvent entraîner
une mutation définie comme un changement permanent
de la séquence d'ADN. Les mutations peuvent être de plusieurs types,
comme la substitution, la suppression, l'insertion et la translocation.
Des mutations peuvent être induites ou se produire spontanément.
Types d'ADN particuliers.
L'ADN
bactérien.
L'ADN bactérien
est le matériel génétique des bactéries.
Ils se présente généralement sous forme d'un chromosome circulaire unique
situé dans le cytoplasme , dans une région appelée nucléoïde. L'ADN
bactérien est généralement constitué d'un chromosome unique et circulaire.
Ce chromosome contient la majorité des gènes essentiels à la vie de
la bactérie. Il est le support de l'information génétique nécessaire
à toutes les fonctions vitales de la bactérie, de sa croissance à sa
reproduction, en passant par son métabolisme et sa réponse à l'environnement..
En plus du chromosome principal, les bactéries peuvent également posséder
des plasmides. Les plasmides sont de petites molécules d'ADN circulaires,
distinctes du chromosome bactérien, et qui se répliquent indépendamment.
Les plasmides ne sont pas essentiels à la survie de la bactérie dans
des conditions normales, mais ils peuvent porter des gènes qui confèrent
des avantages sélec tifs, comme la résistance aux antibiotiques, la capacité
à dégrader certaines substances, ou la production de facteurs de virulence.
L'ADN bactérien, qu'il soit chromosomique ou plasmidique, est organisé
et compacté dans le nucléoïde, même s'il n'est pas enfermé dans une
membrane nucléaire. Cette organisation permet de loger une longue molécule
d'ADN dans le petit volume de la cellule bactérienne.
L'ADN
mitochondrial.
L'ADN mitochondrial,
abrégé en ADNmt, est un type d'ADN présent dans la plupart des cellules
eucaryotes animales et végétales, mais distinct de l'ADN nucléaire que
l'on trouve dans le noyau des cellules et est beaucoup plus petit que l'ADN
nucléaire. Chez l'humain, il compte environ 16 500 paires de bases. Il
est situé dans les mitochondries,
les organites cellulaires responsables de la
production d'énergie par respiration
cellulaire. Il possède une structure circulaire à double brin, rappelant
celle de l'ADN bactérien, ce qui peut s'expliquer par la la théorie de
l'endosymbiose, selon laquelle les mitochondries proviennent d'anciennes
bactéries aérobies qui ont été englouties par une cellule eucaryote
ancestrale. Au cours de l'évolution, ces bactéries sont devenues des
organites cellulaires, conservant une partie de leur propre ADN.
L'ADNmt contient
relativement peu de régions non codantes et une forte densité de gènes.
Le génome mitochondrial contient de l'information
génétique pour la synthèse de certaines protéines, ARN
et molécules nécessaires au fonctionnement des mitochondries, même si
la majorité des protéines nécessaires pour
leur fonctionnement sont codées par le génome nucléaire et importées
dans les mitochondries. L'ADN mitochondrial code en particulier pour certaines
protéines impliquées dans la chaîne
respiratoire (phosphorylation oxydative), qui est cruciale pour la
production d'ATP par les mitochondries. Il code
également pour des ARN ribosomaux (ARNr) et des ARN de transfert (ARNt)
nécessaires à la synthèse des protéines mitochondriales.
Contrairement Ă
l'ADN nucléaire qui est hérité à la fois du père et de la mère, dans
la plupart des organismes (y compris les humains), l'ADNmt est hérité
presque exclusivement de la mère. Lors de la fécondation, seul le noyau
du spermatozoĂŻde
entre dans l'ovule, tandis que les mitochondries
(et donc l'ADNmt) proviennent principalement de l'ovule. C'est pourquoi
l'ADNmt est un outil précieux pour étudier les lignées maternelles en
génétique des populations et en généalogie. L'ADNmt a un taux de mutation
plus élevé que l'ADN nucléaire. Cela est dû en partie à sa proximité
avec les radicaux libres produits lors
de la respiration cellulaire et à des mécanismes de réparation moins
efficaces. En raison de son héritage maternel et de son taux de mutation
relativement élevé, l'ADN mitochondrial est un outil précieux pour les
études génétiques, l'étude de l'évolution des populations et la recherche
sur certaines maladies, notamment les maladies mitochondriales.
L'ADN
chloroplastique.
L'ADN chloroplastique,
ou ADNcp, est le matériel génétique que l'on trouve dans les chloroplastes.
Les chloroplastes sont des organites essentiels au sein des cellules végétales
et des algues, car ils sont responsables de la photosynthèse. L'ADN chloroplastique
est une petite molécule d'ADN circulaire et double brin, qui elle aussi
ressemble beaucoup à l'ADN bactérien (la théorie endosymbiotique ici
suggère que les chloroplastes descendent d'anciennes cyanobactéries photosynthétiques
qui ont été englouties par une cellule eucaryote primitive; ces cyanobactéries
sont devenues des chloroplastes, conservant leur propre ADN. Il est plus
grand que l'ADNmt, mais plus petit que l'ADN nucléaire : la taille de
l'ADNcp varie entre les espèces, mais il contient environ 100 000 à 200
000 paires de bases. L'ADNcp contient également une forte densité de
gènes, mais peut avoir des régions non codantes plus importantes que
l'ADNmt.
L'ADN chloroplastique
contient des gènes qui codent pour des protéines essentielles à la fonction
du chloroplaste, notamment pour la photosynthèse (en particulier les enzymes
et les protéines des complexes photosynthétiques), pour des ARN ribosomaux
(ARNr) et des ARN de transfert (ARNt) nécessaires à la synthèse des
protéines chloroplastiques, mais aussi pour la réplication et la transcription
de son propre ADN, et pour d'autres protéines impliquées dans le métabolisme
chloroplastique, comme la synthèse des pigments chlorophylliens, etc.
L'héritage de l'ADNcp
est plus variable que celui de l'ADNmt et dépend de l'espèce végétale.
Chez de nombreuses espèces, l'ADNcp est principalement hérité de la
plante mère (via l'ovule). Chez certaines espèces, il peut être hérité
du père (via le pollen). Dans d'autres cas, l'ADNcp peut être hérité
des deux parents. L'ADNcp a généralement un taux de mutation plus faible
que l'ADNmt.
ADN
recombinant.
L'ADN recombinant
est une molécule d'ADN qui a été créée artificiellement en combinant
des fragments d'ADN provenant de sources différentes. Cette technologie
permet de créer des séquences d'ADN qui ne se trouvent pas naturellement
ensemble, en fusionnant des gènes ou des parties de gènes de différentes
origines.
Les gènes spécifiques
que l'on souhaite introduire dans l'ADN recombinant sont isolés à partir
de l'ADN d'un organisme source. Cela peut être effectué en utilisant
des enzymes de restriction, qui coupent l'ADN à des sites spécifiques.
Les gènes isolés sont insérés dans des vecteurs de clonage,
tels que des plasmides ou des virus, qui servent de véhicules pour transporter
les nouveaux gènes dans des cellules hôtes. Ces cellules hôtes peuvent
être des bactéries, des levures, ou d'autres types de cellules. Les vecteurs
contenant les gènes d'intérêt sont introduits dans des cellules hôtes
par un processus appelé transformation. Les cellules hôtes peuvent alors
répliquer le vecteur et exprimer les gènes recombinants.
Des méthodes de
sélection, telles que l'utilisation d'antibiotiques ou de marqueurs génétiques,
sont utilisées pour identifier et isoler les cellules qui ont intégré
avec succès les gènes recombinants. Les cellules hôtes qui ont intégré
les gènes recombinants peuvent être cultivées en grande quantité pour
produire de l'ADN recombinant. Cela peut ĂŞtre utile pour produire des
protéines spécifiques codées par les gènes recombinants.
L'ADN recombinant
a des applications variées, notamment dans la production de médicaments
(par exemple, l'insuline humaine produite par
des bactéries génétiquement modifiées), la modification génétique
des plantes, la recherche biomédicale, et la création de modèles animaux
pour l'étude des maladies génétiques. Cette technologie a ouvert de
nouvelles perspectives dans de nombreux domaines de la biologie et de la
médecine. |
|