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L'ADN
L'ADN, ou acide dĂ©soxyribonuclĂ©ique, est une molĂ©cule d'acide nuclĂ©ique prĂ©sente dans toutes les cellules vivantes. On parle d'ADN nuclĂ©aire pour dĂ©signer celui que l'on trouve dans les cellules eucaryotes, et d'ADN bactĂ©rien pour dĂ©signer celui que l'on rencontre dans les BactĂ©ries (organismes procaryotes). On connaĂ®t aussi d'autres formes d'ADN comme ceux que renferment les mitochondries et les chloroplastes. Il contient toutes les informations nĂ©cessaires pour construire et faire fonctionner un organisme vivant, qu'il s'agisse d'une bactĂ©rie, d'une plante, d'un animal ou d'un ĂŞtre humain. 

L'ADN nuclĂ©aire est le principal support de l'information gĂ©nĂ©tique chez les eucaryotes et rĂ©side au coeur du noyau cellulaire. Il contient la vaste majoritĂ© des gènes et est responsable de l'hĂ©rĂ©ditĂ© classique.  L'ADN nuclĂ©aire est organisĂ© en structures linĂ©aires appelĂ©es chromosomes. Chez l'humain, par exemple, l'ADN nuclĂ©aire est organisĂ© en 23 paires de chromosomes, soit 46 chromosomes au total dans chaque cellule somatique.

L'ADN a une forme caractĂ©ristique de double hĂ©lice, un peu comme une Ă©chelle torsadĂ©e. Cette Ă©chelle est faite de deux brins enroulĂ©s l'un autour de l'autre. Chaque brin de l'ADN est composĂ© de petites unitĂ©s appelĂ©es nuclĂ©otides. Il existe quatre types de nuclĂ©otides, chacun identifiĂ© par une base azotĂ©e (ou nuclĂ©obase) : adĂ©nine (A), thymine (T),, cytosine (C), guanine (G). L'ordre dans lequel ces bases azotĂ©es se succèdent le long de la molĂ©cule d'ADN, en formant des sĂ©quences appelĂ©es gènes, constitue le code gĂ©nĂ©tique. C'est ce code qui dĂ©termine les caractĂ©ristiques d'un organisme, comme la couleur des yeux, la taille, ou encore certaines prĂ©dispositions Ă  des maladies. L'ADN humain renferme autour de 3,4 milliards de nuclĂ©obases (certaines plantes peuvent en avoir plus de 100 milliards). 

Base historique de la compréhension moderne.
L'ADN a d'abord Ă©tĂ© isolĂ© vers 1870 par Friedrich Miescher, qui l'a appelĂ© nuclĂ©ine parce qu'il Ă©tait issu de noyaux des globules blancs (Le sang). Les expĂ©riences, en 1928, de Frederick Griffith avec des souches de Streptococcus pneumoniae ont fourni le premier indice que l'ADN pourrait ĂŞtre un principe transformant. 

Avery, MacLeod et McCarty (1944) ont ensuite prouvĂ© que l'ADN est effectivement requis pour la transformation des bactĂ©ries. 

Des expĂ©riences ultĂ©rieures par Hershey et Chase (1952) utilisant le bactĂ©riophage T2 ont prouvĂ© que l'ADN constitue le matĂ©riel gĂ©nĂ©tique. 

Erwin Chargaff a constaté que le rapport de A = T et C = G, et que la teneur en pourcentage de A, T, G et C est différent pour différentes espèces.

Le modèle actuellement acceptĂ© de la structure Ă  double hĂ©lice de l'ADN a Ă©tĂ© publiĂ© en 1953 par James Watson, Francis Crick et Rosalind Franklin, sur la base des travaux de Maurice Wilkins et Rosalind Franklin. 
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Double hélice de l'ADN.
Double hélice de l'ADN. - L'ADN se présente sous la forme d' une double hélice antiparallèle. L'épine dorsale phosphatée (indiquée par les lignes courbes) se situe à l'extérieur et les bases azotées à l'intérieur. Chaque base d'un brin interagit via une liaison hydrogène avec une base du brin opposé. Crédit : Jerome Walker et Dennis Myts.

Structure en double hélice de l'ADN.
Le diamètre de la double hĂ©lice, 2 nm, est uniforme partout. Le sucre et le phosphate se trouvent Ă  l'extĂ©rieur de l'hĂ©lice, formant l'Ă©pine dorsale de l'ADN. Les bases azotĂ©es sont empilĂ©es Ă  l'intĂ©rieur, comme les marches d'un escalier, par paires; les paires sont liĂ©es les unes aux autres par des liaisons hydrogène. Chaque paire de bases de la double hĂ©lice est sĂ©parĂ©e de 0,34 nm de la paire de bases suivante.  Un tour de l'hĂ©lice compte dix paires de bases.

Les deux brins de l'hélice courent dans des directions opposées, ce qui signifie que l'extrémité carbone 5' d'un brin fera face à l'extrémité carbone 3' de son brin correspondant. Ceci est appelé orientation antiparallèle. Cette orientation est importante pour la réplication de l'ADN et dans de nombreuses interactions avec les acides nucléiques.

Seuls certains types d'appariement de base sont autorisés. Par exemple, une certaine purine ne peut être associée qu'à une certaine pyrimidine. Cela signifie que A peut être associé à T et que G peut être associé à C. En d'autres termes, les brins d'ADN sont complémentaires les uns des autres. Si la séquence d'un brin est AATTGGCC, le brin complémentaire aurait la séquence TTAACCGG.
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Complémentarité des bases azotées de deux brins d'ADN.
Complémentarité des bases azotées. - Dans une molécule d'ADN, les deux brins sont antiparallèles l'un à l'autre de sorte qu'un brin s'étend de 5' 'à 3' et l'autre de 3 'à 5'. L'épine dorsale phosphatée est située à l'extérieur et les bases sont au milieu. L'adénine forme des liaisons hydrogène (ou paires de bases) avec la thymine et les paires de bases guanine avec la cytosine.

La réplication de l'ADN
Pendant la division cellulaire, chaque cellule fille reçoit une copie de l'ADN par un processus appelĂ© rĂ©plication ou duplication de l'ADN. Comme l'a montrĂ© une expĂ©rience de Matthew Meselson et Franklin Stahl en 1958, lors de la rĂ©plication de l'ADN chacun des deux brins d'ADN parentaux sert de modèle pour le nouvel ADN Ă  synthĂ©tiser; après rĂ©plication, chaque ADN Ă  double brin comprend un brin parental ou "ancien" et un "nouveau" brin. C'est ce que l'on a appelĂ© la rĂ©plication semi-conservatrice. Diverses enzymes interviennent dans la facilitation de cette rĂ©plication (hĂ©licase, primase, ADN-polymĂ©rase, et ADN-ligase, cette dernière intervenant spĂ©cialement dans la rĂ©paration des erreurs de rĂ©plication et dans la recombinaison gĂ©nĂ©tique). 

Réplication de l'ADN chez les procaryotes.
La plupart des procaryotes contiennent un seul chromosome circulaire. La réplication chez les procaryotes commence à partir d'une séquence trouvée sur ce chromosome appelée l'origine de la réplication - le point auquel l'ADN s'ouvre. Une enzyme, l'hélicase, ouvre la double hélice d'ADN, entraînant la formation de la fourche de réplication. Les protéines de liaison simple brin se lient à l'ADN simple brin près de la fourche de réplication pour garder la fourche ouverte. Une autre enzyme, la primase, synthétise une amorce d'ARN pour initier la synthèse par l'ADN-polymérase, qui ne peut ajouter des nucléotides que dans la direction 5 'à 3'. Un brin est synthétisé en continu dans le sens de la fourche de réplication; c'est ce qu'on appelle le premier volet. L'autre brin est synthétisé dans une direction éloignée de la fourche de réplication, en de courts segments d'ADN appelés fragments d'Okazaki. Ce brin est connu sous le nom de brin retardé. Une fois la réplication terminée, les amorces d'ARN sont remplacées par des nucléotides d'ADN et l'ADN est scellé avec de l'ADN-ligase, ce qui crée des liaisons phosphodiester entre le 3'-OH d'une extrémité et le phosphate 5 'de l'autre brin.
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Duplication de l'ADN.
Une fourche de réplication est formée lorsque l'hélicase sépare les brins d'ADN à l'origine de la réplication. L'ADN a tendance s' enrouler davantage devant la fourche de réplication. La topoisomérase se casse et réforme l'épine dorsale du phosphate de l'ADN en avant de la fourche de réplication, soulageant ainsi la pression qui résulte de ce super-enroulement. Les protéines de liaison simple brin se lient à l'ADN simple brin pour empêcher l'hélice de se reformer. La primase synthétise une amorce d'ARN. L'ADN polymérase III utilise cette amorce pour synthétiser le brin d'ADN fils. Sur le brin principal, l'ADN est synthétisé en continu, tandis que sur le brin retardé, l'ADN est synthétisé en courtes séquences appelées fragments d'Okazaki. L'ADN-polymérase I remplace l'amorce d'ARN par de l'ADN. L'ADN ligase scelle les espaces entre les fragments d'Okazaki, reliant les fragments en une seule molécule d'ADN. (crédit : Mariana Ruiz Villareal).

Réplication de l'ADN chez les eucaryotes.
La réplication chez les eucaryotes commence à plusieurs origines. Le mécanisme est assez similaire à celui observé chez les procaryotes. Une amorce est nécessaire pour initier la synthèse, qui est ensuite étendue par l'ADN-polymérase lorsqu'elle ajoute des nucléotides un par un à la chaîne en croissance. Le brin principal est synthétisé en continu, tandis que le brin retardé est synthétisé en courtes séquences, les fragments d'Okazaki. Les amorces d'ARN sont remplacées par des nucléotides d'ADN; l'ADN reste un brin continu en liant les fragments d'ADN avec l'ADN-ligase. Les extrémités des chromosomes posent un problème car la polymérase est incapable de les étendre sans amorce. La télomérase, une enzyme avec une matrice d'ARN intégrée, prolonge les extrémités en copiant la matrice d'ARN et en étendant une extrémité du chromosome. L'ADN-polymérase peut ensuite étendre l'ADN à l'aide de l'amorce. De cette façon, les extrémités des chromosomes sont protégées.

La réparation de l'ADN.
L'ADN-polymérase peut faire des erreurs lors de l'ajout de nucléotides. Il modifie l'ADN en relisant chaque base nouvellement ajoutée. Les bases incorrectes sont supprimées et remplacées par la base correcte, puis une nouvelle base est ajoutée. La plupart des erreurs sont corrigées au cours de la réplication, bien que lorsque cela ne se produit pas, le mécanisme de réparation des disparités sot utilisé. Les enzymes de réparation des mésappariements reconnaissent la base mal incorporée et l'extraient de l'ADN, en la remplaçant par la base correcte. Dans encore un autre type de réparation, la réparation par excision nucléotidique, la base incorrecte est supprimée avec quelques bases à l'extrémité 5 'et 3', et celles-ci sont remplacées en copiant la matrice à l'aide de l'ADN-polymérase. Les extrémités du fragment nouvellement synthétisé sont attachés au reste de l'ADN à l'aide de l'ADN-ligase, ce qui crée une liaison phosphodiester.

La plupart des erreurs sont ainsi corrigées, mais celles qui ne le sont pas peuvent entraîner une mutation définie comme un changement permanent de la séquence d'ADN. Les mutations peuvent être de plusieurs types, comme la substitution, la suppression, l'insertion et la translocation. Des mutations peuvent être induites ou se produire spontanément.

Types d'ADN particuliers.
L'ADN bactérien.
L'ADN bactĂ©rien est le matĂ©riel gĂ©nĂ©tique des bactĂ©ries. Ils se prĂ©sente gĂ©nĂ©ralement sous forme d'un chromosome circulaire unique situĂ© dans le cytoplasme , dans une rĂ©gion appelĂ©e nuclĂ©oĂŻde. L'ADN bactĂ©rien est gĂ©nĂ©ralement constituĂ© d'un chromosome unique et circulaire. Ce chromosome contient la majoritĂ© des gènes essentiels Ă  la vie de la bactĂ©rie.  Il est le support de l'information gĂ©nĂ©tique nĂ©cessaire Ă  toutes les fonctions vitales de la bactĂ©rie, de sa croissance Ă  sa reproduction, en passant par son mĂ©tabolisme et sa rĂ©ponse Ă  l'environnement.. En plus du chromosome principal, les bactĂ©ries peuvent Ă©galement possĂ©der des plasmides. Les plasmides sont de petites molĂ©cules d'ADN circulaires, distinctes du chromosome bactĂ©rien, et qui se rĂ©pliquent indĂ©pendamment. Les plasmides ne sont pas essentiels Ă  la survie de la bactĂ©rie dans des conditions normales, mais ils peuvent porter des gènes qui confèrent des avantages sĂ©lec tifs, comme la rĂ©sistance aux antibiotiques, la capacitĂ© Ă  dĂ©grader certaines substances, ou la production de facteurs de virulence. L'ADN bactĂ©rien, qu'il soit chromosomique ou plasmidique, est organisĂ© et compactĂ© dans le nuclĂ©oĂŻde, mĂŞme s'il n'est pas enfermĂ© dans une membrane nuclĂ©aire. Cette organisation permet de loger une longue molĂ©cule d'ADN dans le petit volume de la cellule bactĂ©rienne. 

L'ADN mitochondrial.
L'ADN mitochondrial, abrégé en ADNmt, est un type d'ADN présent dans la plupart des cellules eucaryotes animales et végétales, mais distinct de l'ADN nucléaire que l'on trouve dans le noyau des cellules et est beaucoup plus petit que l'ADN nucléaire. Chez l'humain, il compte environ 16 500 paires de bases. Il est situé dans les mitochondries, les organites cellulaires responsables de la production d'énergie par respiration cellulaire. Il possède une structure circulaire à double brin, rappelant celle de l'ADN bactérien, ce qui peut s'expliquer par la la théorie de l'endosymbiose, selon laquelle les mitochondries proviennent d'anciennes bactéries aérobies qui ont été englouties par une cellule eucaryote ancestrale. Au cours de l'évolution, ces bactéries sont devenues des organites cellulaires, conservant une partie de leur propre ADN.

L'ADNmt contient relativement peu de rĂ©gions non codantes et une forte densitĂ© de gènes. Le gĂ©nome mitochondrial contient de l'information gĂ©nĂ©tique pour la synthèse de certaines protĂ©ines, ARN et molĂ©cules nĂ©cessaires au fonctionnement des mitochondries, mĂŞme si la majoritĂ© des protĂ©ines nĂ©cessaires pour leur fonctionnement sont codĂ©es par le gĂ©nome nuclĂ©aire et importĂ©es dans les mitochondries. L'ADN mitochondrial code en particulier pour certaines protĂ©ines  impliquĂ©es dans la chaĂ®ne respiratoire (phosphorylation oxydative), qui est cruciale pour la production d'ATP par les mitochondries.  Il code Ă©galement pour des ARN ribosomaux (ARNr) et des ARN de transfert (ARNt) nĂ©cessaires Ă  la synthèse des protĂ©ines mitochondriales. 

Contrairement à l'ADN nucléaire qui est hérité à la fois du père et de la mère, dans la plupart des organismes (y compris les humains), l'ADNmt est hérité presque exclusivement de la mère. Lors de la fécondation, seul le noyau du spermatozoïde entre dans l'ovule, tandis que les mitochondries (et donc l'ADNmt) proviennent principalement de l'ovule. C'est pourquoi l'ADNmt est un outil précieux pour étudier les lignées maternelles en génétique des populations et en généalogie. L'ADNmt a un taux de mutation plus élevé que l'ADN nucléaire. Cela est dû en partie à sa proximité avec les radicaux libres produits lors de la respiration cellulaire et à des mécanismes de réparation moins efficaces. En raison de son héritage maternel et de son taux de mutation relativement élevé, l'ADN mitochondrial est un outil précieux pour les études génétiques, l'étude de l'évolution des populations et la recherche sur certaines maladies, notamment les maladies mitochondriales.

L'ADN chloroplastique.
L'ADN chloroplastique, ou ADNcp, est le matériel génétique que l'on trouve dans les chloroplastes. Les chloroplastes sont des organites essentiels au sein des cellules végétales et des algues, car ils sont responsables de la photosynthèse. L'ADN chloroplastique est une petite molécule d'ADN circulaire et double brin, qui elle aussi ressemble beaucoup à l'ADN bactérien (la théorie endosymbiotique ici suggère que les chloroplastes descendent d'anciennes cyanobactéries photosynthétiques qui ont été englouties par une cellule eucaryote primitive; ces cyanobactéries sont devenues des chloroplastes, conservant leur propre ADN. Il est plus grand que l'ADNmt, mais plus petit que l'ADN nucléaire : la taille de l'ADNcp varie entre les espèces, mais il contient environ 100 000 à 200 000 paires de bases. L'ADNcp contient également une forte densité de gènes, mais peut avoir des régions non codantes plus importantes que l'ADNmt.

L'ADN chloroplastique contient des gènes qui codent pour des protéines essentielles à la fonction du chloroplaste, notamment pour la photosynthèse (en particulier les enzymes et les protéines des complexes photosynthétiques), pour des ARN ribosomaux (ARNr) et des ARN de transfert (ARNt) nécessaires à la synthèse des protéines chloroplastiques, mais aussi pour la réplication et la transcription de son propre ADN, et pour d'autres protéines impliquées dans le métabolisme chloroplastique, comme la synthèse des pigments chlorophylliens, etc.

L'héritage de l'ADNcp est plus variable que celui de l'ADNmt et dépend de l'espèce végétale. Chez de nombreuses espèces, l'ADNcp est principalement hérité de la plante mère (via l'ovule). Chez certaines espèces, il peut être hérité du père (via le pollen). Dans d'autres cas, l'ADNcp peut être hérité des deux parents. L'ADNcp a généralement un taux de mutation plus faible que l'ADNmt.

ADN recombinant.
L'ADN recombinant est une molécule d'ADN qui a été créée artificiellement en combinant des fragments d'ADN provenant de sources différentes. Cette technologie permet de créer des séquences d'ADN qui ne se trouvent pas naturellement ensemble, en fusionnant des gènes ou des parties de gènes de différentes origines.

Les gènes spĂ©cifiques que l'on souhaite introduire dans l'ADN recombinant sont isolĂ©s Ă  partir de l'ADN d'un organisme source. Cela peut ĂŞtre effectuĂ© en utilisant des enzymes de restriction, qui coupent l'ADN Ă  des sites spĂ©cifiques. Les gènes isolĂ©s sont insĂ©rĂ©s dans des vecteurs de clonage, tels que des plasmides ou des virus, qui servent de vĂ©hicules pour transporter les nouveaux gènes dans des cellules hĂ´tes. Ces cellules hĂ´tes peuvent ĂŞtre des bactĂ©ries, des levures, ou d'autres types de cellules. Les vecteurs contenant les gènes d'intĂ©rĂŞt sont introduits dans des cellules hĂ´tes par un processus appelĂ© transformation. Les cellules hĂ´tes peuvent alors rĂ©pliquer le vecteur et exprimer les gènes recombinants. 

Des mĂ©thodes de sĂ©lection, telles que l'utilisation d'antibiotiques ou de marqueurs gĂ©nĂ©tiques, sont utilisĂ©es pour identifier et isoler les cellules qui ont intĂ©grĂ© avec succès les gènes recombinants. Les cellules hĂ´tes qui ont intĂ©grĂ© les gènes recombinants peuvent ĂŞtre cultivĂ©es en grande quantitĂ© pour produire de l'ADN recombinant. Cela peut ĂŞtre utile pour produire des protĂ©ines spĂ©cifiques codĂ©es par les gènes recombinants. 

L'ADN recombinant a des applications variées, notamment dans la production de médicaments (par exemple, l'insuline humaine produite par des bactéries génétiquement modifiées), la modification génétique des plantes, la recherche biomédicale, et la création de modèles animaux pour l'étude des maladies génétiques. Cette technologie a ouvert de nouvelles perspectives dans de nombreux domaines de la biologie et de la médecine.

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